島津液相色譜柱的使用方法涉及多個(gè)步驟

　　島津液相色譜柱是一款新開(kāi)發(fā)的高純硅膠液相色譜柱。具有高分離度、高惰性、高柱效、耐污染等特點(diǎn)，該系列色譜柱可在較寬pH范圍、較高比例水相流動(dòng)相條件下穩(wěn)定使用。廣泛適用于食品、藥品、環(huán)境等多個(gè)領(lǐng)域的分析檢測(cè)項(xiàng)目。其通過(guò)優(yōu)化的表面鍵合密度，在保證良好分離效果的前提下，可提供適中的疏水作用力，化合物洗脫更快，分析效率更高。在與島津高分離度系列VP-ODS和GIS C18的對(duì)比實(shí)驗(yàn)中可以看到，使用SHIMSEN Ankylo C18色譜柱可獲得相當(dāng)?shù)姆蛛x效果，同時(shí)出峰更迅速。柱效更高，峰形也更尖銳。

　　島津液相色譜柱的使用方法涉及多個(gè)步驟，以下是詳細(xì)的操作指南：

　　一、前期準(zhǔn)備

　　選擇合適的色譜柱

　　根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)選擇色譜柱類(lèi)型。如分析極性化合物可選擇反相色譜柱（如C18柱），非極性化合物可選擇正相色譜柱（如硅膠柱）。

　　考慮色譜柱的柱長(zhǎng)、內(nèi)徑和粒度等參數(shù)。柱長(zhǎng)影響分離度，內(nèi)徑?jīng)Q定流速和進(jìn)樣量，粒度與柱效有關(guān)。一般較長(zhǎng)、較細(xì)粒度的色譜柱有更高的分離能力，但壓力也相對(duì)較大。

　　配置流動(dòng)相

　　精確稱(chēng)取或量取所需溶劑，按比例混合。例如，對(duì)于反相色譜常用的甲醇-水或乙腈-水體系，要注意溶劑的純度和混合均勻性。

　　對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾和超聲脫氣。使用0.45μm或更小孔徑的濾膜過(guò)濾，以去除雜質(zhì)；超聲脫氣時(shí)間一般為15-30分鐘，避免流動(dòng)相中存在氣泡影響泵的工作和檢測(cè)準(zhǔn)確性。

　　準(zhǔn)備樣品

　　樣品要溶解在合適的溶劑中，且溶劑要與流動(dòng)相互溶，避免產(chǎn)生沉淀或?qū)е律V柱堵塞。

　　樣品溶液的濃度要適中，一般根據(jù)檢測(cè)器的靈敏度和色譜柱的負(fù)載能力來(lái)確定，通常在mg/mL到μg/mL級(jí)別。

　　樣品溶液同樣需要過(guò)濾，以防止固體顆粒進(jìn)入色譜柱。

　　二、裝柱與連接

　　安裝色譜柱

　　將色譜柱安裝在液相色譜儀的柱溫箱內(nèi)指d位置，確保色譜柱兩端的接頭與儀器的管路連接緊密，防止漏液。

　　注意色譜柱的方向，一般入口端標(biāo)記為“In”，出口端標(biāo)記為“Out”，不要接反。

　　連接管路

　　按照儀器說(shuō)明書(shū)的要求，將流動(dòng)相的管路連接到色譜柱的入口端，將色譜柱的出口端連接到檢測(cè)器。

　　檢查所有連接是否牢固，可適當(dāng)擰緊接頭，但不要過(guò)度用力以免損壞色譜柱或管路。

　　三、系統(tǒng)平衡

　　沖洗色譜柱

　　用較低流速（一般0.1-0.5mL/min）的流動(dòng)相沖洗色譜柱，沖洗體積約為色譜柱體積的10-20倍。目的是去除色譜柱內(nèi)可能存在的雜質(zhì)和保存液。

　　觀察柱壓和流出液的情況，確保柱壓穩(wěn)定，流出液無(wú)異常顏色或雜質(zhì)。

　　平衡色譜柱

　　逐漸增加流動(dòng)相流速到設(shè)定的分析流速，繼續(xù)沖洗色譜柱，直到基線(xiàn)穩(wěn)定。這個(gè)過(guò)程可以使色譜柱內(nèi)的固定相達(dá)到充分的平衡狀態(tài)，保證分離效果的重復(fù)性。

　　平衡時(shí)間因色譜柱類(lèi)型和流動(dòng)相組成而異，一般需要30分鐘到數(shù)小時(shí)不等。

　　四、進(jìn)樣分析

　　設(shè)置進(jìn)樣參數(shù)

　　根據(jù)樣品性質(zhì)和分析要求，在儀器控制軟件上設(shè)置進(jìn)樣量、進(jìn)樣速度等參數(shù)。進(jìn)樣量要合適，過(guò)大會(huì)超過(guò)色譜柱負(fù)載能力，導(dǎo)致峰形展寬；過(guò)小則可能檢測(cè)不到足夠的信號(hào)。

　　選擇合適的進(jìn)樣方式，如手動(dòng)進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣。手動(dòng)進(jìn)樣時(shí)要注意進(jìn)樣針的操作規(guī)范，避免帶入空氣或污染樣品。

　　啟動(dòng)分析

　　點(diǎn)擊儀器控制軟件上的“開(kāi)始”按鈕，啟動(dòng)泵輸送流動(dòng)相，同時(shí)進(jìn)樣閥切換將樣品注入色譜柱。

　　觀察基線(xiàn)和峰形變化，記錄色譜圖。分析過(guò)程中要保持流動(dòng)相流速、柱溫等條件的穩(wěn)定。

　　五、清洗與維護(hù)

　　清洗色譜柱

　　每次分析完成后，用適當(dāng)?shù)娜軇_洗色譜柱。對(duì)于反相色譜柱，可先用強(qiáng)溶劑（如甲醇或乙腈）沖洗，然后換用弱溶劑（如水）；對(duì)于正相色譜柱，可先用正己烷等非極性溶劑沖洗，后用極性稍強(qiáng)的溶劑。

　　清洗時(shí)間一般為色譜柱體積的3-5倍，以去除樣品殘留。

　　再生色譜柱

　　當(dāng)色譜柱的性能下降，如出現(xiàn)峰形變寬、保留時(shí)間改變或柱壓升高等情況時(shí)，需要進(jìn)行再生。

　　再生方法因色譜柱類(lèi)型而異。對(duì)于反相色譜柱，可嘗試用1-2M的NaOH溶液沖洗，然后用水和甲醇依次沖洗；對(duì)于正相色譜柱，可用適當(dāng)?shù)乃峄驂A溶液處理。再生后要充分水洗和平衡后再使用。

　　儲(chǔ)存色譜柱

　　如果長(zhǎng)時(shí)間不使用色譜柱，要將色譜柱從儀器上取下，清洗干凈后，充滿(mǎn)合適的保存液（如甲醇或乙腈），兩端密封好，放置在陰涼干燥處保存。